Geralmente os lobos acasalam para toda a vida e, habitualmente, apenas o par alfa se reproduz, sendo eles que conduzem a vida da alcateia devido às suas qualidades de força e inteligência.

Os lobos atingem a maturidade sexual por volta dos dois a três anos de idade. As fêmeas parecem atingir a maturidade sexual um pouco mais cedo que os machos.

Ao contrário dos cães, os lobos apenas se reproduzem uma vez por ano. As lobas entram em estro uma única vez e numa época específica do ano, podendo ser no fim do Inverno ou início da Primavera, entre Janeiro e Março, durante uma a duas semanas, altura em que se dá o acasalamento.

À medida que se aproxima a época do acasalamento, o casal alfa passa cada vez mais tempo junto.  Este “namoro” prolonga-se por várias semanas. O acasalamento dá-se quando a fêmea entra em estro. A gestação é de cerca de dois meses (63 dias)  e só quando está na fase final é que a loba deixa de acompanhar o resto da alcateia nas suas deslocações.

Os locais de criação situam-se em zonas pouco frequentadas pelo Homem, em vales com vegetação relativamente densa e sempre na proximidade de um riacho, de uma nascente ou de um rio.

Em Portugal os nascimentos dão-se, em geral, durante o mês de Maio podendo ocorrer entre Maio e Junho, nascendo entre quatro a seis lobitos por ninhada.

Com cerca de um mês de idade, os lobitos começam a explorar as imediações do local onde nasceram e têm início as suas relações sociais com o resto da alcateia.